（斷腸草提取物對小鼠的急性毒殺研究）

　　【摘要】

　　目標(biāo)探討斷腸草提取物對小鼠的毒力作用.

　　方法灌胃法.

　　結(jié)果斷腸草提取物對小鼠存在很強的鴆殺作用.一次性注射0.5m

　　L、濃度為0.003、0.004、0.005g/ml的斷腸草提取物時，小鼠在30min內(nèi)的逝世亡率分辨為8.33%、41.67%、100%.同時，斷腸草提取物對小鼠的鴆殺作用敏捷.當(dāng)濃度為0.005g/ml時，小鼠在20min內(nèi)全部逝世亡，均勻致逝世時光為12.8min；濃度為0.004g/ml時，試鼠在28min內(nèi)逝世亡了5只，殘余的2d內(nèi)未見逝世亡；濃度為0.003g/m，l試鼠在16min時逝世亡1只，殘余的2d內(nèi)仍未見逝世亡.中毒小鼠均表示出活動緩慢，步調(diào)不穩(wěn)，身材抽搐，膚色變黑等一些癥狀.

　　論斷斷腸草提取物對小鼠鴆殺作用明顯，所需劑量少，致逝世時光短，為開動員物性滅鼠劑供給了技巧參考.

　　鼠類不僅品種多、個體數(shù)量多，而且成長發(fā)育快，存在強盛的滋生力、散布廣、迫害重大等.目前防治鼠害的方法重要有化學(xué)滅鼠、生物滅鼠、人工機械滅鼠等.長期以來利用最多、最廣的為化學(xué)滅鼠.但化學(xué)滅鼠會使害鼠易產(chǎn)生耐藥性跟拒食性，導(dǎo)致防效降落，且造成環(huán)境沾染，產(chǎn)生二次中毒[1].斷腸草（GelesemiumelegansBenth）屬馬錢科（Logani-

　　aceae）胡蔓藤屬（Gelesemium），俗名大茶藥、胡蔓藤等，為多年生常綠藤本動物.斷腸草在醫(yī)藥、畜牧業(yè)跟農(nóng)業(yè)方面都有開發(fā)跟利用[2-3]，尤其在醫(yī)藥方面開發(fā)利用的很多，研究表明斷腸草有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、鎮(zhèn)痛、醫(yī)治皮膚病、擴瞳等作用.斷腸草含多種鉤吻堿，有劇毒，民間常用作殺蟲劑，故亦名"菜蟲

　　藥".駱悅等[4]發(fā)明，斷腸草甲醇粗提物及斷腸草

　　生物堿對福壽螺幼螺跟成螺有良好的把持作用.然

　　而斷腸草對害鼠的研究鮮見報道，本文抉擇斷腸草

　　提取物，研究對小鼠的毒力作用，為進(jìn)一步研制動物

　　性殺鼠劑供給技巧參考.

　　1資料與方法

　　1.1小鼠實驗于2010年3~4月在廣東省惠州南生成物科技有限公司進(jìn)行.實驗小鼠取自該公司養(yǎng)殖的昆明種小鼠，滋生多代，選取體重18~22g的健康小鼠做為實驗對象.

　　1.2斷腸草乙醇提取物（膏狀）由惠州南生成物科技有限公司經(jīng)索氏抽提提取并供給.

　　1.3試劑75%乙醇，蒸餾水等，市售.

　　1.4儀器電子天平、注射器、棕色小瓶、量筒、燒

　　杯、玻璃棒.

　　1.5方法采取灌胃法[5]，操作步驟如下：以左手捉持小鼠，使腹部朝上，頸部拉直.右手持灌胃管（由1~2ml注射器上連接磨去針尖的針頭制成）.灌胃管長約4~5cm，直徑約1mm，先從小鼠口角插進(jìn)口腔內(nèi)，而后用灌胃管壓其頭部，使口腔與食道成始終線.再將灌胃管從舌面緊沿上腭進(jìn)入食道，灌胃管插入約1/2處將藥液注入.若遇阻力，應(yīng)退出灌胃管再插入，留神操作時動作要輕.

　　1.6斷腸草提取物毒性實驗

　　1.

　　6.1斷腸草提取物藥液的配制用電子天秤稱取斷腸草提取物1g，用10ml的20%乙醇溶解，攪拌均勻，配制成濃度為0.1g/ml的斷腸草提取物母液，盛于棕色小瓶中，放入4%冰箱保存.利用時以10倍梯度濃度稀釋母液，分辨配制成0.1、0.01跟0.001g/ml3個濃度藥液.

　　1.

　　6.2斷腸草提取物毒性料想定將小鼠按A（0.1g/ml）、B

　?。?.01g/ml）、C

　?。?.001g/ml）分為3組，每組4只小鼠，禁食12h后用灌胃法對小鼠一次性注射0.5m，l而后畸形豢養(yǎng)，察看小鼠的反應(yīng)，記錄小鼠逝世亡時光及逝世亡數(shù)量.每個組重復(fù)3次.

　　1.

　　6.3斷腸草提取物毒性測定隨機選取48只小鼠，按A

　?。?.005g/ml）、B

　　（0.004g/ml）、C

　　（0.003g/ml）、D

　?。?.002g/ml）分為4組，每組4只試鼠，重復(fù)3次，實驗方法同

　　1.

　　4.2.

　　1.

　　6.4小鼠中毒反應(yīng)察看灌胃后5d內(nèi)察看記錄各組小鼠在注射后的反應(yīng)及中毒癥狀.

　　2結(jié)果與剖析

　　2.1鴆殺預(yù)實驗測定灌胃0.5ml斷腸草提取物對小鼠的鴆殺料想定結(jié)果見表1.0.1g/ml斷腸草提取物處理后，小鼠在12min內(nèi)全部逝世亡，均勻致逝世時光為7.4min；注射灌胃斷腸草提取物0.01g/m，l小鼠在21min內(nèi)全部逝世亡，均勻致逝世時光為13.3min；而灌胃斷腸草提取物0.001g/ml時，在2d內(nèi)未見小鼠逝世亡.同時還可看出，當(dāng)提取物濃度在0.01g/ml以上時，隨著濃度的增加小鼠逝世亡時光縮短.由此表明，斷腸草提取物在濃度達(dá)0.01g/ml以上時對小鼠有較強的鴆殺作用.故毒性實驗中采取0.01~0.001g/ml濃度進(jìn)行測定.

　　2.2毒性實驗結(jié)果灌胃0.5ml斷腸草提取物對小鼠的毒性實驗結(jié)果（表2）.當(dāng)灌胃濃度為0.005g/ml時，試鼠在20min內(nèi)就全部逝世亡，均勻致逝世時光為12.8min；當(dāng)灌胃濃度為0.004g/ml時，試鼠在28min內(nèi)逝世亡了5只，殘余的2d內(nèi)未見逝世亡；當(dāng)灌胃濃度為0.003，試鼠在16min時逝世亡1只，殘余的2d內(nèi)未見逝世亡；灌胃濃度為0.002g/ml時，2d內(nèi)均未見小鼠逝世亡.

　　從表2中可看出，小鼠的逝世亡率隨著濃度的降落而降落，逝世亡時光也向后推遲.灌胃濃度在0.005g/ml以上，小鼠在20min內(nèi)全部逝世亡.灌胃濃度為0.003g/ml以上時，28min內(nèi)小鼠逝世亡率為41.67%.灌胃濃度達(dá)0.003g/ml時，小鼠的逝世亡率很低，僅為8.33%，表明對小鼠有明顯鴆殺作用的濃度為0.003~0.005g/m，l且在這可致逝世濃度范疇內(nèi)，隨著作用劑量的增加，小鼠的致逝世時光縮短.

　　2.3小鼠中毒癥狀察看灌胃后，最初小鼠無異樣；5min左右，小鼠活動緩慢，步調(diào)不穩(wěn)，蜷縮著，頭部開端抽動，緩緩地小鼠全身顫抖；再過一段時光后，小鼠開端活潑跳動，在鼠籠內(nèi)到處竄跳，顫抖更加厲害；瀕臨逝世亡時，小鼠連續(xù)掙扎，前腿不動蹬后腿，1min左右抽搐不止直至逝世亡.同時，小鼠在掙扎進(jìn)程中，身材膚色由原來的粉紅色逐步變黑，眼睛外突.此外，察看還發(fā)明，有些小鼠在后期會呈現(xiàn)磨牙景象.

　　3論斷

　　研究結(jié)果表明，斷腸草提取物對小鼠鴆殺作用明顯，存在急性致逝世的后果.在可致逝世濃度范疇內(nèi)，隨著灌胃濃度的增加，小鼠的致逝世時光減少，個別致逝世時光約30min.當(dāng)斷腸草提取物濃度在0.005g/ml以上時，20min內(nèi)小鼠全部逝世亡.同時灌胃后小鼠存在一個短暫的埋伏期，約5min左右.之后，小鼠則開端表示出一些全身顫抖、抽搐等癥狀，直至逝世亡.據(jù)研究報道，斷腸草植株中含有的活性成分叫鉤吻堿，屬于吲哚類堿，植株各局部生物堿的含量以根皮部（1.5%~2.2%）為最高，莖皮（1%~1.1%）次之，莖含量為0.4%~0.5%，葉含量僅0.3%[3].這為下一步分別跟提純殺鼠活性成分，為斷腸草作為動物源滅鼠劑的開發(fā)供給了依據(jù).

　　在實際防控工作中，因為化學(xué)藥物一直呈現(xiàn)抗性、公害等問題，人們越來越偏向于從天然物質(zhì)中尋找更保險、更有效的活性物質(zhì)，以開發(fā)新型的動物源農(nóng)藥.動物性農(nóng)藥來源于天然，有其順暢的降解途徑，無殘毒遺留，不沾染環(huán)境，不易產(chǎn)生抗藥性，因此受到普遍關(guān)注.韓崇選等[6]對多種動物進(jìn)行了殺鼠活性的測定，發(fā)明曼陀羅、苦參、鐵棒錘等動物對試鼠存在較強的鴆殺活性，且無二次中毒景象產(chǎn)生.詹紹琛等[7]用鬧羊花進(jìn)行滅鼠實驗，表明鬧羊花葉煎劑灌服或毒餌試鼠都有較強的毒性.張美文等[8]將煙草水煮液與玉米粉、面粉餌料按一定的比例制成的毒餌豢養(yǎng)小鼠，表明煙草對鼠類也存在較好的鴆殺作用.我國動物質(zhì)源極為豐富，對動物源農(nóng)藥的研究歷史久長，有豐富的教訓(xùn)跟深沉的基本.因此，研究與開發(fā)保險性高的動物性滅鼠劑，將成為現(xiàn)今新型滅鼠劑研制的熱點，對解決當(dāng)前化學(xué)滅鼠劑所引起的社會跟環(huán)境問題存在重要的意思.

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